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壹(yi)、實驗方案(an)
1.1 實驗目的(de)
以透過(guo)豬皮進(jin)入(ru)擴(kuo)散(san)池內(nei)的(de)透明質(zhi)酸(suan)含(han)量為指(zhi)標(biao),基於豬皮擴(kuo)散(san)模型,評價(jia)玻(bo)尿(niao)酸(suan)水(shui)感細(xi)致面(mian)膜單(dan)獨使(shi)用(yong)和搭(da)配(pei)富氫幹(gan)膜布使(shi)用(yong)時(shi)透明質(zhi)酸(suan)鈉(na)的(de)透皮功(gong)效(xiao)。
1.2 待(dai)測(ce)樣本信(xin)息
玻(bo)尿(niao)酸(suan)水(shui)感細(xi)致面(mian)膜、富氫幹(gan)膜布。
1.3 待測指(zhi)標(biao)
以透明質(zhi)酸(suan)原(yuan)料中(zhong)的(de)透明質(zhi)酸(suan)鈉(na)為測試指(zhi)標(biao),其(qi)在玻(bo)尿(niao)酸(suan)水(shui)感細(xi)致面(mian)膜內(nei)含(han)量為 0.03%。
1.4 主要(yao)試劑及(ji)設(she)備(bei)
待測樣、生(sheng)理(li)鹽水(shui)。
豬皮(乳(ru)豬背(bei)部(bu)皮膚),剝(bo)離豬皮並(bing)剪成(cheng)小圓片(pian),用(yong)遊(you)標(biao)卡(ka)尺(chi)測(ce)量(liang)厚度,選 擇厚度在 0.5~0.6 mm 之間的(de)豬皮。藥(yao)物(wu)透皮擴(kuo)散(san)試驗儀、1525μ 型高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)儀。
1.5實驗分組
組別(bie) | 類型 | 培(pei)養(yang)條(tiao)件 | 檢測方法 |
1 | 玻(bo)尿(niao)酸(suan)水(shui)感細(xi)致面(mian)膜 | 37℃恒(heng)溫水(shui)浴(yu) | HPLC法 |
2 | 玻(bo)尿(niao)酸(suan)水(shui)感細(xi)致面(mian)膜+富氫幹(gan)膜布 | 37℃恒(heng)溫水(shui)浴(yu) | HPLC法 |
二、測(ce)試方法
2.1 透明質(zhi)酸(suan)鈉(na)透皮擴(kuo)散(san)實驗
用(yong)移(yi)液(ye)槍吸(xi)取(qu) 6.5mL 生(sheng)理(li)鹽水(shui)加(jia)入(ru)擴(kuo)散(san)室(shi)中(zhong),放置(zhi)豬皮並(bing)用(yong)夾子(zi)夾好立(li)式(shi)擴(kuo)散(san)池,將(jiang)面(mian)膜裁剪合適大(da)小(xiao)後平(ping)鋪(pu)於豬皮上,用保(bao)鮮膜(mo)封(feng)住擴(kuo)散(san)池,放入(ru) 37℃恒(heng)溫水(shui)浴(yu)中(zhong),磁(ci)力(li)攪拌(ban)速(su)度為 300rpm。放置(zhi) 15 min 後,用移(yi)液(ye)槍吸(xi)取(qu) 0.3 mL擴(kuo)散(san)室(shi)內(nei)溶液(ye),待留(liu)存(cun)此溶(rong)液(ye)後補(bu)充加(jia)入(ru) 0.3 mL 生(sheng)理(li)鹽水(shui)。再次放入(ru)恒(heng)溫水(shui)浴(yu)中(zhong),30 min、1h、2h 後(hou)做相(xiang)同(tong)取(qu)樣操作。
2.2 高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)測(ce)定含(han)量
將(jiang)取(qu)樣留(liu)存(cun)的(de)溶液(ye)透過(guo) 0.45μm 的(de)濾膜,用(yong)微(wei)量(liang)進樣針(zhen)吸(xi)取(qu)10μL 打(da)入(ru)液(ye)相(xiang)色譜(pu)中(zhong),待(dai)樣品(pin)峰被洗脫(tuo)後計算峰面(mian)積。以峰面(mian)積與原(yuan)液(ye)面積比標(biao)定(ding)擴(kuo)散(san)池中(zhong)透明質(zhi)酸(suan)鈉(na)濃度(原液(ye)透明質(zhi)酸(suan)鈉(na)濃度已知(zhi))。
固(gu)定(ding)相(xiang): C18 柱(zhu)(4.6×250mm,5μm)
流動相(xiang):乙腈(jing):水(shui)=90:10
流速(su):1mL/min
柱(zhu)溫:25℃
檢測波長:194nm
四(si)、測(ce)試結論(lun)
玻(bo)尿(niao)酸(suan)水(shui)感細(xi)致面(mian)膜搭(da)配(pei)富氫幹(gan)膜布使(shi)用(yong)時(shi)透明質(zhi)酸(suan)鈉(na)的(de)透皮速(su)率(lv)顯著 高(gao)於玻(bo)尿(niao)酸(suan)水(shui)感細(xi)致面(mian)膜單(dan)獨使(shi)用(yong),初(chu)始(shi)透皮速(su)率(lv)(15min 內(nei))是玻(bo)尿(niao)酸(suan)水(shui)感細(xi)致面(mian)膜單(dan)獨使(shi)用(yong)的(de)約(yue) 2.8 倍,120min 透皮率(lv)可(ke)達(da)到(dao) 27.1%。

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