果糖含量(liang)壹鍵測(ce)量(liang)，媽媽再(zai)也不用擔(dan)心！

旋光法測(ce)定(ding)果糖含量(liang)：原(yuan)理、操(cao)作與註(zhu)意事項(xiang)

壹、方(fang)法(fa)概述

旋光法測(ce)定(ding)果糖含量(liang)是(shi)壹種基(ji)於果糖對平面(mian)偏振(zhen)光振(zhen)動面(mian)旋(xuan)轉(zhuan)能力(li)的定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)方(fang)法(fa)。其(qi)核心優(you)勢在(zai)於(yu)操(cao)作相對簡(jian)便、重現(xian)性(xing)好(hao)，且對(dui)儀(yi)器(qi)耗(hao)材(cai)的要(yao)求(qiu)相對不高，因(yin)此在食品、制藥和(he)化工(gong)等(deng)多個行業(ye)中得到了廣(guang)泛應(ying)用(yong)，為果糖相關產(chan)品(pin)的質量(liang)控制提(ti)供了可(ke)靠的技(ji)術(shu)支撐(cheng)。

二(er)、核心操作(zuo)步驟(zhou)

（壹）樣品(pin)準(zhun)備(bei)

精確稱(cheng)取壹定量(liang)（常(chang)規稱(cheng)取10g，精度需(xu)達到(dao)0.0001g）的樣(yang)品，該樣品(pin)需(xu)經過70℃真空幹燥4小時處(chu)理，以(yi)去除水分(fen)及揮(hui)發(fa)性(xing)雜質，確保樣品成分(fen)穩(wen)定(ding)，提(ti)高測(ce)定(ding)準(zhun)確(que)性(xing)。

（二(er)）配制溶液

將預(yu)處(chu)理後的樣(yang)品溶(rong)解(jie)於適(shi)量(liang)蒸(zheng)餾水(shui)中，隨後加入(ru)少量(liang)氨(an)試(shi)液（例如0.2mL的6mol/L氨(an)試(shi)液），攪(jiao)拌(ban)均(jun)勻(yun)後，將溶(rong)液轉移(yi)至100mL容量(liang)瓶(ping)中，用蒸(zheng)餾水(shui)定(ding)容至(zhi)刻度線(xian)。蓋緊容量(liang)瓶(ping)塞後充(chong)分搖(yao)勻，靜(jing)置(zhi)30分鐘備(bei)用(yong)。加入(ru)氨(an)試(shi)液並靜(jing)置(zhi)的關鍵作用是(shi)加(jia)速果糖旋光(guang)度達(da)到(dao)穩(wen)定(ding)狀態(tai)，避(bi)免(mian)因(yin)旋(xuan)光度波動影(ying)響(xiang)測(ce)定(ding)結果。

（三）儀(yi)器(qi)準(zhun)備(bei)

開啟(qi)YJ-9100C全自動旋光儀(yi)電源，進行預(yu)熱(re)，預(yu)熱(re)時間(jian)至少為5分鐘（由(you)於鈉(na)光(guang)燈(deng)需(xu)要(yao)達到(dao)穩(wen)定(ding)發(fa)光(guang)狀態(tai)，部(bu)分(fen)型(xing)號(hao)的旋(xuan)光儀(yi)可(ke)能要(yao)求(qiu)更(geng)長的預(yu)熱(re)時間(jian)，需(xu)嚴格(ge)遵(zun)循(xun)儀(yi)器(qi)說明(ming)書）。預(yu)熱(re)完成後，用蒸(zheng)餾水(shui)作(zuo)為空白對(dui)照(zhao)，對(dui)旋光儀(yi)進(jin)行零點(dian)校正(zheng)，確(que)保儀(yi)器(qi)初始狀態(tai)無(wu)誤(wu)。

（四）測(ce)定(ding)旋光(guang)度

用配制好(hao)的試(shi)樣溶(rong)液潤(run)洗(xi)旋光管(guan)內壁數(shu)次(ci)，以(yi)避(bi)免(mian)管(guan)內殘留的蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)其他(ta)雜質對試(shi)樣溶(rong)液造(zao)成稀(xi)釋或汙(wu)染(ran)。潤(run)洗(xi)後，將試(shi)樣溶(rong)液緩慢(man)註(zhu)入(ru)旋光(guang)管(guan)中，操作過程中需(xu)確保(bao)管內無氣(qi)泡(pao)存(cun)在，因(yin)為氣(qi)泡(pao)會(hui)幹(gan)擾(rao)光路(lu)，導(dao)致測(ce)定(ding)誤差。將裝(zhuang)有試(shi)樣溶(rong)液的旋(xuan)光管(guan)放(fang)入(ru)旋光(guang)儀(yi)的指(zhi)定(ding)位(wei)置(zhi)，在(zai)規定溫度（通(tong)常(chang)為20℃或25℃）下讀取旋光(guang)度(du)數(shu)值(zhi)。為提(ti)高結果可(ke)靠性，需(xu)重復(fu)測(ce)量(liang)數(shu)次(ci)，最終取多次(ci)測(ce)量(liang)結(jie)果的平均(jun)值(zhi)作(zuo)為本次(ci)測(ce)定(ding)的旋(xuan)光度(du)數(shu)據(ju)。

（五）結果計算(suan)

根據(ju)旋光(guang)法(fa)相關計算(suan)公式，結(jie)合測(ce)定(ding)得到(dao)的平均(jun)旋(xuan)光(guang)度數(shu)值(zhi)、樣(yang)品(pin)稱(cheng)樣量(liang)、溶(rong)液體積等(deng)參(can)數(shu)，計算(suan)出試(shi)樣中果糖的含量(liang)或(huo)濃度。具體公式需(xu)根據(ju)實際測(ce)定(ding)條件(jian)及相關標(biao)準(zhun)規範確定。

三、關鍵註意事項(xiang)

1. 測(ce)定(ding)時間(jian)控制：為保證測(ce)定(ding)結果的準(zhun)確(que)性(xing)，試(shi)樣溶(rong)液配制完成(cheng)後，應在(zai)30分鐘內(nei)進(jin)行旋(xuan)光度測(ce)定(ding)，避(bi)免(mian)因(yin)放(fang)置(zhi)時間(jian)過長導(dao)致溶(rong)液成分(fen)或旋光(guang)度(du)發(fa)生(sheng)變(bian)化。

2. 嚴格(ge)溫度控制：溫度對(dui)果糖的旋(xuan)光度(du)影(ying)響(xiang)顯(xian)著(zhu)，因(yin)此必須嚴格(ge)控制測(ce)定(ding)過程中的溫度，通(tong)常(chang)控制在20℃或25℃。同時，溫度允(yun)許(xu)的波動範圍(wei)極(ji)小（壹般為±0.5℃），需(xu)借助(zhu)恒(heng)溫水浴等(deng)設(she)備(bei)維(wei)持溫度穩(wen)定(ding)。

3. 樣品溶液要(yao)求(qiu)：用於測(ce)定(ding)的樣(yang)品溶(rong)液必須澄(cheng)清透(tou)明(ming)，不得含有懸(xuan)浮物或(huo)氣(qi)泡(pao)。若(ruo)溶液出現(xian)渾(hun)濁現(xian)象(xiang)，需(xu)進行(xing)過濾處(chu)理；若(ruo)旋光管(guan)內存在氣(qi)泡(pao)，應(ying)通(tong)過輕輕敲擊(ji)、傾(qing)斜(xie)等(deng)方(fang)式(shi)將其(qi)排(pai)除。

4. 規範儀(yi)器(qi)操作：每(mei)次(ci)測(ce)量(liang)前(qian)，務(wu)必使用蒸(zheng)餾水(shui)對(dui)旋光(guang)儀(yi)進(jin)行零點(dian)校正(zheng)，以(yi)消除儀(yi)器(qi)系(xi)統誤差。使用(yong)旋光管時，需(xu)用幹(gan)凈(jing)柔軟(ruan)的紗(sha)布或(huo)鏡頭(tou)紙(zhi)將其(qi)外(wai)壁(bi)擦拭(shi)幹凈(jing)，避(bi)免(mian)殘(can)留溶液影(ying)響(xiang)光路(lu)；同時，每(mei)次(ci)放(fang)置(zhi)旋(xuan)光(guang)管(guan)的方(fang)向(xiang)和(he)位(wei)置(zhi)應(ying)盡(jin)量(liang)保(bao)持壹致，減(jian)少因(yin)放(fang)置(zhi)差異(yi)帶來的測(ce)定(ding)誤差。

四、果糖的變(bian)旋現(xian)象(xiang)解(jie)析(xi)

果糖具有典(dian)型的變(bian)旋現(xian)象(xiang)，即其在溶解(jie)於水(shui)後，旋光(guang)度會(hui)在(zai)初期(qi)發(fa)生(sheng)持續變(bian)化。這(zhe)是(shi)因(yin)為果糖分子(zi)在溶(rong)液中會(hui)發(fa)生(sheng)構(gou)型(xing)轉(zhuan)化，形(xing)成不同的異(yi)構(gou)體(ti)，不同異(yi)構(gou)體(ti)的旋(xuan)光能(neng)力(li)存在(zai)差異(yi)，導(dao)致溶(rong)液整體(ti)旋光度(du)處(chu)於動態變(bian)化中。為縮(suo)短旋(xuan)光(guang)度(du)達到(dao)穩(wen)定(ding)的時間(jian)，提(ti)高測(ce)定(ding)效率(lv)，在(zai)配(pei)制溶液時加入(ru)堿性(xing)氨(an)試(shi)液並靜(jing)置(zhi)30分鐘，可(ke)有效加(jia)速果糖異(yi)構(gou)體(ti)之間(jian)的平衡轉化，使(shi)溶(rong)液旋光(guang)度穩(wen)定(ding)，從(cong)而(er)保證測(ce)定(ding)結果的準(zhun)確(que)性(xing)。